Ussing odası - Ussing chamber

Ussing odasının temel prensibi:
(1) epitel dokusu
(2) Ringer çözümlü iki yarım oda
(3) (4) Agar-Ringer köprüler
(5) doymuş KCl-AgCl çözeltisi
(6) değişken DC kaynağı
(7) ampermetre
(8) doymuş KCl-Kalomel elektrot
(9) voltmetre
Membran potansiyelinin temeli

Bir Ussing odası epitel membran özelliklerini ölçmek için bir aparattır. Canlı dokunun taşınmasını ve bariyer işlevlerini tespit edip ölçebilir. Ussing odası Danimarkalılar tarafından icat edildi zoolog ve fizyolog Hans Henriksen Ussing 1946'da.[1]

Teknik, kısa devre akımını ağın bir göstergesi olarak ölçmek için kullanılır. iyon taşıma bir karşısında yer almak epitel. Kullanım odaları, doğal ortamda iyon taşınmasını ölçmek için kullanılır. doku bağırsak gibi mukoza ve tek tabakada hücreler geçirgen destekler üzerinde büyümüştür.

Fonksiyon

Ussing odası, iyonların, besinlerin ve ilaçların çeşitli epitel dokularında taşınmasını ölçmek için bir sistem sağlar.[2] (lipofilik maddeler için yanlış negatif sonuçlar oluşturabilmesine rağmen[3]). Epitel ile ayrılmış iki yarıdan oluşur (geçirgen destekler üzerinde büyütülen mukoza tabakası veya epitel hücrelerinin tek tabakası). Epitel, doğası gereği kutupsaldır, yani bir apikal veya mukozal taraf ve a bazolateral veya serozal yan. Bir Ussing odası, apikal tarafı bazolateral taraftan izole edebilir. İki yarım oda eşit miktarda simetrik Zil çözümü kimyasal, mekanik veya elektriksel itici güçleri ortadan kaldırmak için. İyon taşınması herhangi bir epitelde gerçekleşir. Ulaşım her iki yönde de olabilir. İyon taşınması bir potansiyel fark epitel boyunca (voltaj farkı). Voltaj, iki voltaj kullanılarak ölçülür elektrotlar doku / epitelin yakınına yerleştirilir. Bu voltaj, epitelden uzağa yerleştirilmiş diğer iki akım elektrodu kullanılarak akım enjekte edilerek iptal edilir. Bu kısa devre akımı (Isc), net iyon taşınmasının ölçüsüdür.

Epitelyal iyon taşınmasının ölçülmesine, Ussing odaları yardımcı olur. Bu iyon aktarımından kaynaklanan voltajın doğru bir şekilde ölçülmesi kolaydır. Epitel, iyonları bir taraftan diğerine pompalar ve iyonlar, epitel hücreleri arasında bulunan sözde sıkı bağlantılardan geri sızar. İyon taşınmasını ölçmek için harici bir akım uygulanır. Gerilimi basitçe iptal etmek, gerçek değeri olduğundan düşük hesaplar. Bu, voltaj ölçüm elektrotlarında bir kısa devre ile düzeltilir. Harici voltaj elektrotları arasındaki direnç dikkate alınmalıdır. Isc, iyon taşınmasını olduğundan az tahmin ediyor: hata 10 katına kadar çıkabilir. Ussing tarafından önerilen oda tipi büyük hatalara neden olur. Bu hata genellikle doku olmadan voltaj ölçülerek tahmin edilir ve bu da belirsiz değerlere yol açar. Daha iyi yöntemler kullanmayı içerir alternatif akım çeşitli frekanslar kullanan kıvrımlı şekilli akım şeklinde, kare dalgası darbeler, keskin darbeler ve rastgele gürültü.[1]

Türler

Ussing odası sistemlerinin ana türleri şunlardır:[4][5]

  • Klasik oda sistemi (Ussing tarafından tasarlandığı şekliyle).
  • Bağımsız oda sistemi (tek bir blokta tam aparat)
  • Çok kanallı oda sistemi (2 ila 24 bağımsız oda birleşik)

Referanslar

  1. ^ a b Ussing Pulse projesi (goto.glocalnet.net)
  2. ^ Fare bağırsağının kullanım odası çalışmaları için bir rehber (Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. Haziran 2009; 296 (6): G1151 – G1166. 2 Nisan 2009'da çevrimiçi yayınlandı.)
  3. ^ Itin, Constantin; Barasch, Dinorah; Domb, Abraham; Hoffman, Amnon (2020). "Yüksek düzeyde lipofilik ilaç kannabidiolün uzun süreli oral transmukozal teslimi". Int J Pharm. 581: 119276. doi:10.1016 / j.ijpharm.2020.119276. PMID  32243971.
  4. ^ Kullanım Odası Sistemleri (harvardappechan.com) (PDF)
  5. ^ Kullanım Odası Sistemleri (physiologicinstruments.com)

Dış bağlantılar